牛乳源金黄色葡萄球菌黏附素分子FnBPA不同功能区生物学活性的比较分析

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2015.07.018

畜牧兽医学报 ›› 2015, Vol. 46 ›› Issue (7): 1208-1214.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.07.018

牛乳源金黄色葡萄球菌黏附素分子FnBPA不同功能区生物学活性的比较分析

邵俊高，张宝江，李善春，王彩蝶，王国勤，苏艳^*

(新疆农业大学动物医学学院，乌鲁木齐 830052)

收稿日期:2014-10-28 出版日期:2015-07-23 发布日期:2015-07-23
通讯作者: 苏艳,女，教授，硕士生导师，主要从事微生物分子致病与免疫研究，E-mail: 2006au@163.com
作者简介:邵俊高（1989-），男，江苏盐城人，硕士，主要从事兽医微生物及免疫研究，E-mail:shaojungao1108@163.com
基金资助:
新疆维吾尔自治区高新技术项目 (201311108)；国家自然科学基金（31260222；31160191）；自治区普通高校重点学科基础兽医学科资助项目

Comparison and Analysis of the Biological Activity of Antiserum after Immunizing with Expressed Different Domains of Staphylococus aureus Adhesin FnBPA Isolated from Bovine Milk

SHAO Jun-gao，ZHANG Bao-jiang，LI Shan-chun，WANG Cai-die，WANG Guo-qin，SU Yan^*

（Veterinary Medicine College of Xinjiang Agricultural University，Urumqi 830052，China）

Received:2014-10-28 Online:2015-07-23 Published:2015-07-23

摘要/Abstract

摘要：

旨在研究和比较牛乳源金黄色葡萄球菌黏附素分子A区（FnBPA-A）和BCD区（FnBPA-BCD）两个功能区重组蛋白质免疫后的生物学功能，并评价其作为抗原开展研制抗金黄色葡萄球菌疫苗的价值。利用原核表达载体pET-28a分别表达重组蛋白质FnBPA-A与FnBPA-BCD，比较二者的黏附特性，并用纯化后的重组蛋白质单独及联合免疫方式免疫新西兰白兔和小鼠，分析比较各组蛋白质诱导的特异性抗体抑制菌体及对纤维蛋白原（Fg）、纤维连接素（Fn）的结合能力，免疫小鼠抗体水平及对小鼠的免疫保护力。结果表明，两种重组蛋白质具有不同的黏附活性，联合免疫组产生的特异性抗体水平及与Fg、Fn的结合能力均较单独免疫组高。重组蛋白质FnBPA的A区及两种蛋白质联合免疫组特异性抗体水平，抗血清对金黄色葡萄球菌Fg，Fn黏附的抑制能力要优于BCD区。免疫小鼠攻毒结果显示各免疫组均对小鼠有良好的保护效果，其中FnBPA的A区蛋白质免疫保护率高于其他试验组。该研究的结果可为牛源金黄色葡萄球菌性的乳腺炎新型疫苗的优化设计与合理应用提供依据。

Abstract:

The aim of this study was to express FnBPA-A（A domain of fibrinogen-binding region A）and FnBPA-BCD (BCD domain of fibrinogen-binding region A different domains of FnBPA) of Staphylococcus aureus，and compare the adhesion inhibition activities of their antiserum for prevention of bovine mastitis caused by S.aureus.FnBPA-A and FnBPA-BCD encoding genes were cloned and inserted into pET-28a vector.Then the recombinant proteins were expressed and purified to immune Newzeland rabbits and mice.The adhesin binding ability，adhesion inhibition activity of their serum antibody and challenge protection ability were tested.The results showed that the antibody level，the binding ability to Fg and Fn and adhesion inhibition activity of FnBPA-A and FnBPA-BCD co-immunization group were better than that of single immunization groups.The mice antibody level of FnBPA-A immunization group and co-immunization group were better than that of FnBPA-BCD immunization group.In addition，FnBPA-A and co-immunization group showed better adhesion inhibition activity to Fg，FnBPA-BCD and co-immunization group showed better adhesion inhibition activity to Fn.The immunological protection result showed that each group had good protective effect and FnBPA-A immunization group was the best one.The results of this study may provide the basis for design of new vaccines of bovine mastitis caused by S.aureus.

中图分类号:

S852.611

邵俊高，张宝江，李善春，王彩蝶，王国勤，苏艳. 牛乳源金黄色葡萄球菌黏附素分子FnBPA不同功能区生物学活性的比较分析[J]. 畜牧兽医学报, 2015, 46(7): 1208-1214.

SHAO Jun-gao，ZHANG Bao-jiang，LI Shan-chun，WANG Cai-die，WANG Guo-qin，SU Yan. Comparison and Analysis of the Biological Activity of Antiserum after Immunizing with Expressed Different Domains of Staphylococus aureus Adhesin FnBPA Isolated from Bovine Milk[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, 2015, 46(7): 1208-1214.

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参考文献

［1］LAMMERS A，NUIJTEN P J，KRUIJT E，et al.Cell tropism of Staphylococcus aureus in bovine mammary gland cell cultures［J］.Vet Microbiol，1999，67(2)：77-89.
［2］陈怀青，陆承平.金黄色葡萄球菌的粘附素［J］.中国人兽共患病杂志，1996，12(6)：43-44.
CHEN H Q，LU C P.The adhesins of Staphylococcus aureus［J］.Chinese Journal of Zoonoses，1996，12(6)：43-44.(in Chinese)
［3］周宏，李韩平，姜永强，等.金黄色葡萄球菌表面蛋白研究进展［J］.生物技术通讯，2004，15(1)：73-75.
ZHOU H，LI H P，JIANG Y Q，et al.The progress of Staphylococcus aureus surface proteins［J］. Letters in Biotechnology，2004，15(1)：73-75.(in Chinese)
［4］任士飞，徐建生，董国雄，等.细菌黏附研究进展［J］.中国预防兽医学报，2004，26(3)：238-240.
REN S F，XU J S，DONG G X，et al.Progress in research of bacterial adherence［J］.Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine，2004，26(3)：238-240.(in Chinese)
［5］KEANE F M，LOUGHMAN A，VALTULINA V，et al.Fibrinogen and elastin bind to the same region within the A domain of fibronection binding protein A，an MSCRAMM of Staphylococcus aureus［J］.Mol Microbiol，2007，63(3)：711-723.
［6］LOUGHMAN A，SWEENEY T，KEANE F M，et al.Sequence diversity in the A domain of Staphylococcus aureus fibronectin-binding protein A［J］.BMC Microbiol，2008，8：74.
［7］CASOLINI F，VISAI L，JOH D，et al.Antibody response to fibronectin-binding adhesin FnbpA in patients with Staphylococcus aureus infections［J］.Infect Immun，1998，66(11)：5433-5442.
［8］JOH H J，HOURSE P K，PATTI J M，et al.Fibronectin receptors from Gram-positive bacteria：comparison of active sites［J］.Biochemistry，1994，33(20)：6086-6092.
［9］何焱，谢红霞，杨岚，等.牛源金黄色葡萄球菌FnBPA A基因与D基因表达产物的免疫原性比较［J］.中国兽医科学，2014，44(5)：480-484.
HE Y，XIE H X，YANG L，et al.Comparison of immunogenicity between the expressed proteins of FnBP A gene and D gene of Staphylococcus aureus from cattle［J］.Chinese Veterinary Science，2014，44(5)：480-484.(in Chinese)
［10］杨宏军，高运东，王长法，等.金黄色葡萄球菌粘附素Fnbp A功能区基因的克隆和原核表达［J］.西北农林科技大学学报：自然科学版，2008，36(1)：54-58.
YANG H J，GAO Y D，WANG C F，et al.Cloning and expression of the functional Fnbp A gene of Staphylococcus aureus adhesin［J］.Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition)，2008，36(1)：54-58.(in Chinese)
［11］赵艳，张爱荣，郝永清.金黄色葡萄球菌的FnBPA D基因片段的表达［J］.中国预防兽医学报，2009，31(5)：361-365.
ZHAO Y，ZHANG A R，HAO Y Q.Cloning and expression of the D fragment of fibronectin-binding protein A gene from Staphylococcus aureus［J］.Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine，2009，31(5)：361-365.(in Chinese)
［12］BROUILLETTE E，LACASSE P，SHKRETA L，et al.DNA immunization against the clumping factor A (ClfA) of Staphylococcus aureus［J］.Vaccine，2002，20(17-18)：2348-2357.
［13］史冬艳，郝永清，张爱荣.奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌FnbpB-D基因的表达及其抗血清活性［J］.中国预防兽医学报，2010，32(5)：356-359.
SHI D Y，HAO Y Q，ZHANG A R.Expression of fibronectin-binding protein B (FnbpB) region D of Staphylococcus aureus and antiserum activity［J］.Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine，2010，32(5)：356-359.(in Chinese)
［14］张向新，石庆华，王世民，等.新疆奶牛乳腺炎致病性金黄色葡萄球菌FnbpA 基因的克隆与序列分析［J］.新疆农业大学学报，2010，33(5)：422-426.
ZHANG X X，SHI Q H，WANG S M，et al.Clone and sequence analysis of FnbpA gene of Staphylococcus aureus isolated from Xinjiang dairy cow with subclinical Mastitis［J］.Journal of Xinjiang Agricultural University，2010，33(5)：422-426.(in Chinese)
［15］范鑫，郝永清，张爱荣，等.金黄色葡萄球菌黏附素FnBPB-ClFA共表达质粒的构建与原核表达［J］.中国兽医科学，2011，41(2)：173-177.
FAN X，HAO Y Q，ZHANG A R，et al.Construction and prokaryotic expression of the co-expression plasmid with FnBPB-ClFA gene encoding Staphylococcus aureus adhesion［J］.Chinese Veterinary Science，2011，41(2)：173-177.(in Chinese)
［16］GAUDREAU M C，LACASSE P，TALBOT B G.Protective immune responses to a multi-gene DNA vaccine against Staphylococcus aureus［J］.Vaccine，2007，25(5)：814-824.

[1]	吕若一, 司晓慧, 孙志刚, 史晓敏, 刘晓晔. 猪链球菌耐药现状分析及感染防控措施[J]. 畜牧兽医学报, 2023, 54(12): 4920-4933.
[2]	胡秀花, 孙芷馨, 赵梦洋, 谢佳琪, 王敏, 陈海良, 葛昕, 刘天龙, 王少林. 野生松鼠源屎肠球菌的致病性与耐药性分析[J]. 畜牧兽医学报, 2023, 54(7): 3012-3021.
[3]	卢婉青, 赵莎莎, 蒋松宏, 童智子, 黄丹妮, 郭建华, 吴俊伟, 周洋. 金黄色葡萄球菌对BV2细胞IFN-α生成的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2022, 53(8): 2633-2641.
[4]	毛彦妮, 常佳伟, 李娜, 王鑫, 康馨匀, 马强, 马靓, 王桂琴. 金黄色葡萄球菌在生物被膜态与浮游态的转录组差异表达分析[J]. 畜牧兽医学报, 2022, 53(8): 2697-2707.
[5]	杜宇, 蒲小峰, 陈晓萌, 吕芬芬, 汪丽, 张泽华, 张宝江, 苏艳. 新疆地区3株驴源马链球菌马亚种新SeM基因型的鉴定与进化分析[J]. 畜牧兽医学报, 2022, 53(1): 231-240.
[6]	张海霞, 张振彪, 代禾根, 宋昱, 李蕾, 夏兆飞. 中国部分地区犬源伪中间葡萄球菌的流行特征分析[J]. 畜牧兽医学报, 2021, 52(9): 2561-2568.
[7]	章婧, 蔡萍, 贺奕卓, 陈伟涛, 黄宇晨, 蒋红霞. 广东省养禽场肠球菌耐药性及毒力因子流行分布特征[J]. 畜牧兽医学报, 2021, 52(9): 2650-2659.
[8]	张金柠, 钱梦樱, 唐永杰, 米思远, 师科荣, 俞英. 金黄色葡萄球菌表面蛋白A对奶牛乳腺上皮细胞的黏附作用[J]. 畜牧兽医学报, 2021, 52(5): 1369-1377.
[9]	吕芬芬, 马晓慧, 汪丽, 马陈, 张宝江, 苏艳. 马链球菌马亚种3种抗原蛋白对小鼠免疫的免疫原性分析[J]. 畜牧兽医学报, 2021, 52(3): 752-762.
[10]	张行, 李新圃, 武小虎, 丁学智, 严作廷, 王胜义, 李宏胜. 牛源金黄色葡萄球菌生物被膜与毒素基因检测及agr分型[J]. 畜牧兽医学报, 2020, 51(11): 2903-2910.
[11]	马强, 杨蕊, 万佳宏, 常佳伟, 魏彦琴, 王桂琴. 宁夏地区牛源金黄色葡萄球菌β-内酰胺酶的分析及作用方式的研究[J]. 畜牧兽医学报, 2020, 51(5): 1138-1148.
[12]	马强, 王艺晖, 常佳伟, 万佳宏, 魏彦琴, 王桂琴. 金黄色葡萄球菌细胞壁变化与β-内酰胺类抗生素耐药的关系[J]. 畜牧兽医学报, 2020, 51(3): 602-611.
[13]	马维武, 周学章. 金黄色葡萄球菌PV-杀白细胞素的表达及其对奶牛乳腺上皮细胞的损伤作用[J]. 畜牧兽医学报, 2019, 50(10): 2105-2112.
[14]	龚永平, 陈珍容, 阴文奇, 文继峰, 易可可, 颜其贵. 林麝源屎肠球菌LS170308株多重耐药基因岛PRI1分析[J]. 畜牧兽医学报, 2019, 50(6): 1275-1283.
[15]	陈申申, 马家乐, 张新锋, 曲向阳, 潘子豪, 姚火春. 致仔猪脑膜炎猪链球菌的分离鉴定[J]. 畜牧兽医学报, 2019, 50(1): 143-150.

牛乳源金黄色葡萄球菌黏附素分子FnBPA不同功能区生物学活性的比较分析

Comparison and Analysis of the Biological Activity of Antiserum after Immunizing with Expressed Different Domains of Staphylococus aureus Adhesin FnBPA Isolated from Bovine Milk

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